کیت تشخیص قارچ

تشريح محيط كشت سريع تشخيص درماتوفيتوز ساخت دی ام اس آمريكا

‏RapidVet برای استفاده در تشخيص درماتوفيتوز پوستی حیوانات همراه، مثل سگ و گربه و خرگوش و اسب تولید شده است. ‏ RapidVet از یک فرمولاسیون اختصاصی برای تشخیص قارچ ایجاد کننده علایم کلیینیکی استفاده می‌کند لذا نباید برای گونه‌های دیگر حیوان و یا انسان استفاده شود. در همین راستا RapidVet برای تست حضور درماتوفیت‌های زنده و خاموش که بدون علامت روی سطح پوست زندگی می‌کنند طراحی نشده است.

در اواخر دهه ۱۹۶۰ و اوایل دهه ۱۹۷۰، Taplin و همکاران محیطی را برای شناسایی و رشد کمکی درماتوفیت ها تولید کردند که کار قبلی Sabouraud را بهبود می‌بخشید. مواد مغذی ویژه استفاده شده در تولید این محیط کشت، رشد درماتوفیت‌ها را تسریع می‌نمود در حالیکه که آنتی بادی‌های انتخابی، رشد قارچ های ساپروفیت غیر پاتوژن و باکتری‌ها را مهار می‌نمود. متابولیت‌های آلکالینی توسط قارچ‌های جنس تریکوفیتون، اپیدرموفیتون که رشد آن‌ها روی محیط کشت باعث ایجاد یک مشخصه به صورت تغییر رنگ قابل تشخیص در pH، فنل سرخ تولید می‌شوند. تست بر اساس این محیط کشت به ۱۴ روز زمان بری کامل شدن نیاز دارد.

‏RapidVet با توجه به نیاز دامپزشکان به دستیابی سریع نتایج، پیشرفت بیشتری در این زمینه ارایه نموده است. این تست برای مصرف کلینیکی طراحی شده است که به سرعت بیشتری احتمال ابتلا به درماتوفیتوز را مشخص می نمایند. این محصول با بهره گیری از یک فرمول اختصاصی بر اساس واکنش با سوبسترا تولید می گردد.

اصول کلی تست

RapidVet از یک واکنش سوبسترایی تشخیص دهنده استفاده می‌کند که قادر است ارگانیسم های متابولیزه کننده مواد مغذی و تولید مواد متابولیتی آلکالینی را خیلی سریعتر از محیط کشت های Sabouraud و Taplin‌، عمدتاً در سه روز مورد هدف قرار دهد. همچنین دیگر ارگانیسم هایی که در حالت طبیعی موجب تغییر pH و تغییر رنگ می‌شود، به صورت تهاجمی سرکوب می‌کند.

ریجنت ها و/یا مواد مورد نیاز

• ۲۵ لوله در آبی حاوی سوبسترای واکنش تعیین کننده RapidVet-D
• ۲۵ عدد لیبل برای شناسایی لوله های مخصوص به هر کیث

متریال تامین نشده مورد نیاز

• اسکالپل
• فورسپس (پنس)، قیچی یا ناخن‌گیر (اختیاری)

نگهداری و انبار داری

به منظور تامین نیاز های دامپزشکان این محصول طوری طراحی شده است که در دمای اتاق به مدت ۲۴ ماه قابل نگهداری می باشد (دور از نور مستقیم خورشید). عمر این محصول با نگهداری در یخچال ۸-۲ درجه سانتیگراد (۳۶-۴۶°F) می تواند به ۶۰ ماه افزایش یابد. اگر از یخچال برای نگهداری استفاده شود لوله ها باید پیش از مصرف به دمای محیط برسند. در هر صورت از اینکه در معرض انجماد و یا دمای خیلی بالا قرار گیرد اجتناب شود. تاریخ انقضا روی جعبه مربوط به نگهداری در یخچال می باشد.

جمع آوری نمونه

محل نمونه برداری باید مورد بررسی قرار گیرد تا پیشتر دارویی مصرف نشده باشد. زیرا ممکن است پاسخ تست را تحت تاثیر قرار دهد. در صورت نیاز محل نمونه برداری تمیز شود ولی به طوری که عوامل قارچی احتمالی از بین نروند. گاهی مواقع تمیز کردن محل نمونه برداری برای کاهش باکتری و یا آلودگی های ساپروفیت ها ضروری است. در این مواقع تمیز کردن محل باید محدود به استفاده از یک پد خیس خورده در الکل ایزوپروپیل ۷۰% باشد.

برای نمونه برداری از یک اسکالپل جهت برداشتن مو از محل دور ضایعه قابل دید با چشم استفاده شود. در بعضی مواقع استفاده از پنس برای برداشت مو می تواند راحت تر باشد. اگر مو به عنوان نمونه مورد استفاده قرار می‌گیرد قسمت بیشتر از دو سانتیمتر (۸/۰ اینچ) از پوست باید بریده شده و دور انداخته شود. اگر نمونه مورد استفاده ناخن باشد برش از لبه ناخن می تواند مناسب باشد.

نمونه را بدون فشار روی سطح سوبسترای واکنش قرار دهید و در پیچی لوله را بسته نگه دارید. لوله را با نام بیمار و تاریخ تست لیبل کنید. لوله ها در زمان مورد نیاز انجام تست در دمای اتاق نگهداری می شوند. منظور از دمای اتاق ۲۵-۲۲ درجه سانتیگراد (۷۲-۷۷°F) می باشد.

نتایج

به صورت دوره ای هر تیوب را ۷۲ ساعت یکبار بررسی کنید. هر گونه تغییر رنگ از زرد به قرمز، حتی یک ناحیه خیلی کوچک به عنوان نتیجه مثبت و حضور درماتوفیت ها ارزیابی می گردد. گرچه درجه قرمزی با مرور زمان بیشتر و ناحیه قرمز شده نیز گسترش می یابد. لوله باید طبق پروتکل دفع زباله محلی دفع گردد.

عملکرد تحقيقات كلنيكی

هنگامی که از ۸۲۰ سگ، ۳۶۹ گربه و ۴۹۲ اسب مشکوک به درماتفوفیتوز جمع آوری شد، RapidVet-D ۵۱۰ نمونه (۳۰.۳%) مثبت نشان داد که ۴۹۴ نمونه با متدولوژی مرجع انجام شده توسط یک متخصص تایید شده بود. بنابراین مقدار مثبت کاذب می تواند ۱/۳٪ در نظر گرفته شود.